{"id":1689,"date":"2016-10-26T18:41:29","date_gmt":"2016-10-26T16:41:29","guid":{"rendered":"http:\/\/www.ematologialasapienza.it\/?page_id=1689"},"modified":"2024-05-04T10:06:27","modified_gmt":"2024-05-04T08:06:27","slug":"ricerca-laboratorio","status":"publish","type":"page","link":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/?page_id=1689","title":{"rendered":"Ricerca laboratorio"},"content":{"rendered":"
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Ricerca di laboratorio<\/h2><\/span>
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Nei laboratori del Centro sono in corso progetti di ricerca che coprono alcuni grandi temi nello studio dei meccanismi alla base della malattie ematologiche e nella ricerca\u00a0di diagnosi, prognosi e terapia di nuovi e pi\u00f9 efficaci protocolli.<\/p>\n

In particolare, sono attualmente in corso studi su:<\/p>\n

    \n
  1. Ricerca di\u00a0marcatori prognostici<\/strong>\u00a0alla diagnosi in pazienti affetti da leucemie acute e croniche, dal punto di vista clinico-biologico, immunofenotipico, molecolare e genomico.<\/li>\n
  2. Monitoraggio della\u00a0malattia minima residua<\/strong>\u00a0dopo terapia in pazienti affetti da leucemie acute e cliniche, sia attraverso tecniche di biologia molecolare che immunofenotipiche.<\/li>\n
  3. Studio dei\u00a0meccanismi patogenetici<\/strong>\u00a0alla base della trasformazione leucemica, comprese le alterazioni a carico di particolari geni e di proteine implicate nei segnali di trasduzione ed i meccanismi di resistenza della cellula leucemica.<\/li>\n
  4. Ricerca di\u00a0nuovi bersagli terapeutici<\/strong>\u00a0e valutazione in vitro di potenziali farmaci anti-leucemici, come inibitori specifici di segnali di trasduzione o di meccanismi proliferativi.<\/li>\n
  5. Immunoterapia<\/strong>\u00a0cellulare come possibile strategia terapeutica alternativa nelle leucemie acute e croniche.<\/li>\n
  6. Analisi del\u00a0profilo genomico\u00a0<\/strong>per una migliore stratificazione prognostica e per l\u2019identificazione di geni come potenziali bersagli di strategie terapeutiche innovative.<\/li>\n
  7. Analisi di \u201cWhole Genome\/Exome Sequencing\u201d di cellule tumorali e germinali per la\u00a0caratterizzazione genetica<\/strong>\u00a0delle patologie ematologiche.<\/li>\n
  8. Uso di tecniche di \u201cNext Generation Sequencing\u201d per l\u2019identificazione di subcloni<\/strong>\u00a0che possono influenzare la risposta o la resistenza alle terapie in varie patologie ematologiche.<\/li>\n<\/ol>\n<\/div><\/div><\/div>
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    Laboratori<\/h2><\/span>
    <\/div><\/div><\/div>

    I diversi laboratori di ricerca del Centro di Ematologia, di cui alcuni esclusivamente dedicati, indagano tutti gli aspetti relativi alla genesi, allo sviluppo ed alla terapia delle malattie ematologiche, usufruendo ciascuno di macchinari e tecniche specifiche.<\/span><\/p>\n<\/div><\/div><\/div>

    <\/i><\/div>

    Laboratorio di Immunofenotipo<\/h2><\/div>
    <\/div>
    \n

    Laboratorio di Immunofenotipo<\/strong><\/p>\n

    Responsabile <\/strong>Maria Stefania De Propris, MD, PhD, Div. of Hematology, Dept. of Cellular Biotechnologies and Hematology “Sapienza” University of Rome,<\/p>\n

    Dedicato alla\u00a0 diagnostica\u00a0 immunofenotipica delle emopatie <\/strong><\/p>\n

    Studio delle caratteristiche antigeniche di superficie ed intracitoplasmatiche \u00a0delle cellule ematiche, normali e neoplastiche<\/strong><\/p>\n

    Tecniche<\/strong>
    \nCitofluorimetria a flusso a 12 colori
    \nImmunocitochimica
    \nImmunofluorescenza su vetrino<\/p>\n

    Attivit\u00e0 diagnostica<\/strong>
    \nStudio della caratterizzazione immunofenotipica di cellule ematiche su sangue periferico, sangue midollare, sospensioni linfonodali, versamenti.
    \nDiagnosi immunofenotipica \u00a0di leucemie acute e delle malattie linfoproliferative croniche
    \nDiagnosi e monitoraggio di Emoglobinuria Parossistica Notturna (EPN).
    \nStudio immunofenotipico della malattia minima residua nelle leucemie acute linfoidi, mieloidi, \u00a0nella leucemia linfatica cronica e nel mieloma.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 di ricerca<\/strong>
    \nLinee di ricerca in atto:
    \nDefinizione immunofenotipica della malattia minima residua nelle leucemie acute e croniche.
    \nStudio del valore prognostico di antigeni nella leucemia linfatica cronica e leucemia linfoide acuta.<\/p>\n

    Caratterizzazione immunofenotipica del mieloma multiplo e valutazione della malattia minima residua<\/p>\n

    Studio immunofenotipico delle popolazioni immunocompetenti nei pazienti sottoposti a trapianto allogenico valutando l\u2019espressione di antigeni linfocitari B, T, NK e la presenza di antigeni di attivazione unitamente alla valutazione della produzione di citochine intracitoplasmatiche<\/p>\n

    Studio delle popolazioni T reg.<\/p>\n

    Monitoraggio in vivo delle\u00a0 CAR-T\u00a0cell in pazienti sottoposti a terapia cellulare \u00a0con CAR-T.<\/p>\n

    STAFF<\/strong><\/p>\n

    Maria Stefania De Propris
    \n<\/strong>Medico Chirurgo, \u00a0Biologo, Specialista in Patologia Clinica<\/em><\/p>\n<\/div><\/div><\/div>

    <\/i><\/div>

    Laboratorio di Citomorfologia<\/h2><\/div>
    <\/div>
    \n

    Per lo studio delle caratteristiche morfologiche delle cellule leucemiche<\/strong><\/p>\n

    Tecniche
    \nCitometria automatizzata.
    \nCitomorfologia e citochimiche su sangue venoso periferico e midollare.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 diagnostica<\/strong>
    \nDiagnostica e monitoraggio morfologico di patologie ematologiche oncologiche e non.
    \nConsulenza morfologica per strutture esterne.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 di ricerca<\/strong>
    \nLinee di ricerca in atto:
    \nValutazione morfologica all\u2019interno dello studio integrato LLC, familiarit\u00e0 in pazienti con LLC.
    \nValutazione morfologica all\u2019interno dei protocolli clinici attivi nel Centro di Ematologia.<\/p>\n<\/div><\/div><\/div>

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    Laboratorio di Citogenetica<\/h2><\/div>
    <\/div>
    \n

    Dedicato all\u2019utilizzo delle tecniche specifiche di citogenetica ed ibridazione in situ per lo studio delle alterazioni cromosomiche delle cellule ematiche neoplastiche<\/strong><\/p>\n

    Tecniche<\/strong>
    \nCitogenetica convenzionale con bandeggio cromosomico GTG su cellule di midollo osseo e\/o sangue periferico, fibroblasti, altri tessuti.
    \nIbridazione in Situ Fluorescente (FISH) con sonde centromeriche, per l\u2019intero cromosoma e locus specifiche, monocolor e\/o dual color.
    \nFiber FISH; Spectral Karyotyping (SKY).<\/p>\n

    Attivit\u00e0 diagnostica<\/strong>
    \nCaratterizzazione citogenetica e citogenetico-molecolare delle neoplasie ematologiche.
    \nMonitoraggio dei pazienti inseriti in differenti protocolli clinici di terapia (es. TMO).<\/p>\n

    Attivit\u00e0 di ricerca<\/strong>
    \nDefinizione di cariotipi complessi mediante SKY.
    \nCaratterizzazione citogenetica-molecolare dei breakpoints di traslocazioni cromosomiche nuove o rare. Studio del cariotipo di cellule di leucemia linfatica cronica stimolate con citochine ed oligonucleotidi.<\/p>\n<\/div><\/div><\/div>

    <\/i><\/div>

    Laboratorio di Centralizzazone<\/h2><\/div>
    <\/div>
    \n

    Dove attraverso la creazione di una banca dati specifica per ciascun protocollo clinico viene compiuta l\u2019analisi delle caratteristiche cliniche e biologiche delle diverse patologie leucemiche<\/strong><\/p>\n

    Tecniche
    \nSeparazione di cellule mononucleate da sangue midollare (MO) e\/o sangue venoso periferico (SVP) su gradiente di densit\u00e0 (ficoll).
    \nCriopreservazione di cellule vitali in DMSO.
    \nBanca di RNA e DNA.
    \nEstrazione di RNA e DNA.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 diagnostica<\/strong>
    \nCentralizzazione dei campioni biologici (MO e SVP) dei pazienti affetti da leucemia linfoide acuta (LAL) e leucemia mieloide acuta (LAM) e di leucemia linfatica cronica (LLC) provenienti da centri ematologici italiani afferenti ai protocolli GIMEMA.
    \nDistribuzione delle cellule mononucleate ai laboratori accreditati GIMEMA.
    \nCoordinamento delle risposte dai laboratori di:
    \nBiologia molecolare (Roma, Torino, Napoli, Bergamo, Palermo),
    \nCitogenetica (Roma, Perugia, Ferrara, Bari),
    \nCinetica cellulare (Roma),
    \nImmunologia (Roma),
    \nMalattia minima residua (MMR) molecolare (Roma, Palermo, Bari, Bergamo, Napoli).
    \nInvio dei referti dei laboratori ai centri di provenienza dei campioni biologici.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 di ricerca<\/strong>
    \nLinee di ricerca in atto:
    \nCreazione di un banca dati per ciascun protocollo GIMEMA.
    \nAnalisi dei dati clinici e biologici.
    \nStudi prognostici su parametri biologici nei pazienti affetti da LAL e LLC afferenti a protocolli GIMEMA.<\/p>\n<\/div><\/div><\/div>

    <\/i><\/div>

    Laboratorio di Coagulazione<\/h2><\/div>
    <\/div>
    \n

    \u00a0<\/strong>Tecniche<\/strong><\/span><\/p>\n

    Test coagulativi con metodo nefelometrico, test cromogenici con metodo colorimetrico, test immunologici con metodo turbidimetrico.<\/p>\n

    ELISA, Immunodiffusione Radiale.<\/p>\n

    Test di Aggregazione Piastrinica.<\/p>\n

    Test di Biologia Molecolare: PCR\u00a0Real Time , PCR Ibridazione Inversa.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 diagnostica<\/strong><\/span><\/p>\n

    Valutazione parametri coagulativi.<\/p>\n

    Dosaggio fattori coagulazione.<\/p>\n

    Dosaggio inibitori fisiologici della coagulazione.<\/p>\n

    Dosaggio allo e autoanticorpi contro i fattori della coagulazione.<\/p>\n

    Ricerca anticorpi antifosfolipidi.<\/p>\n

    Ricerca polimorfismi e\/o mutazioni coinvolti nelle patologie trombofiliche.<\/p>\n

    Studio della malattia di von Willebrand congenita e acquisita e sua classificazione mediante indagini\u00a0\u00a0aggregometrici ed ELISA.<\/p>\n

    Studio delle emofilie A e B.<\/p>\n

    Misurazione PFA.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 di ricerca<\/strong><\/span><\/p>\n

    Studio della carenza del fattore XI.<\/p>\n

    Tromboelastogramma.<\/p>\n

    Test per la misurazione dell’attivit\u00e0 del fattore X nei pazienti che assumono i nuovi anticoagulanti orali.<\/p>\n

    Test generazione della trombina.<\/p>\n<\/div><\/div><\/div>

    <\/div><\/div>
    <\/i><\/div>

    Laboratorio di Biologia Molecolare<\/h2><\/div>
    <\/div>
    \n

    Dove vengono indagate le alterazioni molecolari alla base della trasformazione leucemica
    \n<\/strong><\/p>\n

    \n

    Valutazioni di Malattie Linfoproliferative<\/strong><\/p>\n

    Tecniche<\/strong><\/p>\n

    Estrazione di DNA ed RNA.
    \nPCR qualitativa e quantitativa (RQ-PCR).<\/p>\n

    Digital-PCR.<\/p>\n

    Next Generation equencing.
    \nAltre metodiche di biologia molecolare (ad es. Southern blot, analisi mutazionale mediante DHPLC, etc.).<\/p>\n

    Attivit\u00e0 diagnostica<\/strong>
    \nStudio delle alterazioni molecolari su midollo osseo e sangue periferico.
    \nDiagnosi di malattie linfoproliferative.
    \nStudio molecolare della malattia minima residua.
    \nStudio dei chimerismi in pazienti sottoposti ad allotrapianto.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 di ricerca<\/strong>
    \nLinee di ricerca in atto:
    \nCorrelazione tra alterazioni molecolari alla diagnosi e prognosi in pazienti affetti da LAL.
    \nMonitoraggio della malattia residua ed in particolare in pazienti affetti da LAL trattati con STI.
    \nStudio di sequenza del gene ABL per identificare le mutazioni che danno resistenza alla terapia con inibitori delle tirosin-chinasi.
    \nStudio di correlazione tra attecchimento e chimerismo nel paziente allotrapiantato.<\/p>\n

    \n

    Valutazioni di Malattie Mieloproliferative<\/strong><\/p>\n

    Tecniche<\/strong><\/p>\n

    Estrazione di DNA ed RNA.
    \nPCR e RT-PCR qualitativa e quantitativa (RQ-PCR).<\/p>\n

    Digital-PCR.
    \nImmunofluorescenza indiretta su vetrino.
    \nAltre metodiche di biologia molecolare (ad es. Southern blot, analisi mutazionale mediante DHPLC, etc.)<\/p>\n

    Attivit\u00e0 diagnostica<\/strong>
    \nStudio delle alterazioni molecolari su midollo osseo e sangue periferico.
    \nDiagnosi di malattie mieloproliferative: valutazione delle mutazioni dei geni JAK2, calreticulina, MPL.
    \nStudio molecolare della malattia minima residua.<\/p>\n

    Attivit\u00e0 di ricerca<\/strong>
    \nLinee di ricerca in atto:
    \nCorrelazione tra alterazioni molecolari alla diagnosi e prognosi in pazienti affetti da LAM.
    \nSignificato delle alterazioni dei geni NPM1 e FLT3 in pazienti affetti da LAM.<\/p>\n

    Studio delle mutazioni dei geni IDH1 e IDH2.<\/p>\n

    Valutazione in DD-PCR delle alterazioni del gene JAK2.
    \nStudio mutazionale del gene ABL in pazienti afetti LMC in trattamento con inibitori delle tirosin-chinasi.
    \nMonitoraggio della malattia residua ed in particolare in pazienti affetti da LAM M3 e NPM1+ e LMC.<\/p>\n<\/div><\/div><\/div>

    <\/div><\/div>
    <\/i><\/div>

    Laboratori di Ricerca Traslazionali<\/h2><\/div>
    <\/div>
    \n

    Per lo studio delle malattie linfoproliferative e per l’immunoterapia, i laboratori di ricerca traslazionale comprendono tre gruppi di studio:<\/strong><\/p>\n

      \n
    • Immunologia<\/li>\n
    • Biologia molecolare<\/li>\n
    • Genomica<\/li>\n<\/ul>\n

      La ricerca svolta da questi gruppi \u00e8 principalmente focalizzata su due tipi di patologie: la leucemia linfatica cronica e le malattie linfoproliferative croniche ad essa affini, che rappresentano le pi\u00f9 frequenti neoplasie ematologiche del mondo occidentale, e la leucemia linfatica acuta. I diversi approcci utilizzati (biologia cellulare e molecolare, immunologia, genomica) puntano alla comprensione dei meccanismi patogenetici alla base di queste patologie ed alla sperimentazione in laboratorio di approcci terapeutici alternativi.<\/p>\n

      \n

      IMMUNOLOGIA<\/strong><\/p>\n

      Tecniche<\/strong>:
      \nColture cellulari; test proliferazione; test ELISA; test ELISPOT; immunofenotipo; test angiogenetici; test citotossicit\u00e0; Western Blot; sviluppo popolazioni immunocompetenti.<\/p>\n

      Linee di ricerca in atto:<\/strong><\/p>\n

        \n
      • Studio della espansione di linfociti T e NK anti-CMV in pazienti sottoposti a immunoterapia.<\/li>\n
      • Studio delle popolazioni immunocompetenti nei pazienti affetti da LMC: correlazione con l’uso di IFNalfa, inibitori-TK, raggiungimento della “assenza” di malattia.<\/li>\n
      • Disegno di un protocollo terapeutico che prevede l’infusione di NK espanse in GMP, in pazienti affetti da LAL.<\/li>\n
      • Studio delle popolazioni T reg.<\/li>\n
      • Studio di nuovi inibitori di pathway di segnale in cellule di leucemia linfoide acuta e cronica.<\/li>\n<\/ul>\n
        \n

        BIOLOGIA MOLECOLARE<\/strong><\/p>\n

        Tecniche<\/strong>:
        \nPCR; RT-PCR; NGS; Droplet Digital PCR; sequenziamento geni; clonaggio geni; disegno oligonucleotidi identificanti sequenze; deep sequencing.<\/p>\n

        Attivit\u00e0 diagnostica:<\/strong>
        \nDiagnostica molecolare di linfomi, linfocitosi B, leucemia linfatica cronica, leucemia linfoblastica acuta B e T.<\/p>\n

        Linee di ricerca in atto:<\/strong><\/p>\n

          \n
        • Studio della malattia minima residua in pazienti affetti da LAL B e T e da LLC.<\/li>\n
        • Analisi dello stato mutazionale dei geni che codificano per la regione variabile delle catene pesanti e leggere delle immunoglobuline in pazienti affetti da LLC.<\/li>\n
        • Caratterizzazione dei geni delle immunoglobuline e delle regioni CDR3 in pazienti affetti da LLC.<\/li>\n
        • Studio dei geni TP53 e ATM in pazienti affetti da LLC.<\/li>\n
        • Studio di geni con impatto prognostico nella leucemia linfatica cronica (Notch1, BIRC3, SF3B1 etc..).<\/li>\n
        • Studio di geni correlato allo stadio di malattia e ai diversi compartimenti.<\/li>\n
        • Studio dell\u2019impatto della malattia minima residua con metodiche molecolari nei linfomi, il laboratorio \u00e8 parte attiva del FIL (Fondazione Italiana Linfomi) MRD NETWORK e del gruppo EuroMRD.<\/li>\n<\/ul>\n
          \n

          GENOMICA<\/strong><\/p>\n

          Tecniche<\/strong>:
          \nProfilo di espressione genica; PCR quantitativa; Whole genome sequencing; Deep sequencing.<\/p>\n

          Attivit\u00e0 diagnostica:<\/strong>
          \nStudio del profilo di espressione genica nelle malattie linfoproliferative acute e croniche.<\/p>\n

          Linee di ricerca in atto:<\/strong><\/p>\n

            \n
          • Definizione di profili genici specificatamente associati alle diverse emopatie maligne.<\/li>\n
          • Identificazione di geni con potenziale impatto prognostico nelle leucemie acute B e T.<\/li>\n
          • Identificazione di potenziali targets terapeutici.<\/li>\n
          • Identificazione di nuove mutazioni geniche \u201c driver\u201d o \u201cpasssenger\u201d in leucemie linfoidi acute e croniche.<\/li>\n<\/ul>\n<\/div><\/div><\/div>
            <\/div><\/div><\/div><\/div><\/div><\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"parent":0,"menu_order":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","template":"","meta":{"footnotes":""},"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/pages\/1689"}],"collection":[{"href":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/pages"}],"about":[{"href":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/types\/page"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Fcomments&post=1689"}],"version-history":[{"count":53,"href":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/pages\/1689\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":12230,"href":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/pages\/1689\/revisions\/12230"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/www.ematologialasapienza.it\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Fmedia&parent=1689"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}